Иммунология №2 2011

В. В. Кулаков, Е. А. Макаров, М. В. Пащенков, С. В. Климова, Б. В. Пинегин

ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России (115478, Москва, Каширское ш., д. 24, к. 2); ООО "БиоХарт" (129323, Москва, пр-д Русанова, д. 5)

Пинегин Борис Владимирович — д-р мед. наук, проф., тел. 8(444)617-76-49, e-mail: bvpinegin@yandex.ru.

ЦИТОТОКСИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ ПЕПТИДА LL-37 НА ПЕРЕВИВАЕМЫЕ МИЕЛО- И ЛИМФОБЛАСТОИДНЫЕ КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА

С помощью проточной цитометрии изучен цитотоксический эффект синтетического пептида LL-37 на перевиваемые миело- и лимфобластоидные клеточные линии К-562, Raji, Daudi, Jurkat и мононуклеары периферической крови доноров. Жизнеспособность клеток определяли по включению флюорохрома пропидий-йодида. Установлено, что в дозе 25, 50 и 100 мкг/мл пептид LL-37 оказывает цитотоксический эффект на 20—37, 40—60 и 80—90% перевиваемых клеток. По сравнению с В-клеточными линиями Raji и Daudi Т-клеточная линия Yurkat была менее чувствительна к цитотоксическому эффекту пептида LL-37.Гибель клеток происходила по типу некроза. По сравнению с перевиваемыми клетками чувствительность к цитотоксичесому эффекту пептида LL-37 у мононуклеаров периферической крови доноров была на порядок ниже. CD19+-клетки являются более чувствительными к цитотоксическому эффекту пептида LL-37, чем CD3+-клетки.

Ключевые слова:  кателицидин, hCAP-18/LL-37, цитотоксический эффект, перевиваемые клеточные линии, Т-клетки, В-клетки, проточная цитометрия

ЛИТЕРАТУРА

1. Будихина А. С., Макаров Е. А., Пинегин Б. В. Применение проточной цитометрии для оценки противомикробной активности кателицидина LL-37 // Иммунология. — 2011. — № 1. — С. 34—39.

2. Aarbiou J., Tjabringa G. S., Verhoosel R. M. et al. Mechanisms of cell death induced by the neutrophil antimicrobial peptides α-defesins and LL-37 // Inflam. Res. — 2006. — Vol. 55. — P. 119—127.

3. Cowland J. B., Johnsen A. H., Borregard N. hCAP-18, cathelin/ pro-bactenecin-like protein of human neutrophil specific granules // FEBS Lett. — 1995. — Vol. 368. — P. 173—176.

4. Jahansson J., Gudmundsson G. H., Rottenberg M. E. et al. Conformation-dependent antibacterial activity о the naturally occurring human peptide LL-37 // J. Biol. Chem. — 1998. — Vol. 273. — P. 3718—3724.

5. Larrick J. W., Hirata M., Balint F. et al. Human CAP18: a novel antimicrobial lipopolysaccharide-binding protein // Infect. and Immun. — 1995. — Vol. 63. — P. 1291—1297.

6. Oren Z., Lerman J., Gudmundsson G. H. et al. Structure and organization of the human antimicrobial peptide LL-37 in phospholipid membranes: relevance to the molecular basis for its non-cell-selective activity // Biochem. J. — 1999. — Vol. 341. — P. 501—513.

7. Tjabringa S., Voost J. B., Ninaber D. K. et al. Host defense effector molecule in mucosal secretions // Immunol. Med. Microbiol. — 2005. — Vol. 45. — P. 151—158

8. Wellings D. A., Atherton E. Standard Fmoc protocols // Meth. Enzymol. — 1997. — Vol. 289. — P. 44—67.