Молекулярная генетика, микробиология и вирусология №1 2007

Колодкина В. Л., Титов Л. П., Шарапа Т. Н., Дрожжина О. Н.

Сайты точечных мутаций промоторной области tox-гена и гена регулятора dtxR, ассоциированные с уровнем токсинопродукции Corynebacterium diphtheriae, изолированных в Беларуси

Фрагменты ДНК длиной 129 п. н., содержащие промоторную область tox-гена, 81 токсигенного штамма Corynebacterium diphtheriae исследованы методом конформационного полиморфизма одноцепочечных фрагментов ДНК. Мутация выявлена только у 2 штаммов, обладавших повышенным (> 5120 VERO CD50/мл) уровнем токсинопродукции, в отличие от 41 штамма, характеризовавшихся высоким уровнем (640—5120 VERO CD50/мл), и 38 штаммов, обладавших низким ее уровнем (40—320 VERO CD50/мл). Сиквенс-анализ области между нуклеотидами –232 и +85 tox-оперона выявил замену нуклеотида T на C в позициях –54 и –184. Мутация в позиции –184 находилась за пределами tox-промотора/оператора, а мутация в позиции –54 изменяла прерванный палиндром длиной 9 п. н. в tox-промоторе/операторе от ATAATTAGG у дикого бактериофага b на ACAATTAGG у штаммов с повышенным уровнем токсинопродукции. Сиквенс ДНК-области между нуклеотидами –76 и +681 гена регуляторного белка dtxR 15 штаммов С. diphtheriae выявил 2 миссенс-мутации (A147V; L214I) в C-концевом, третьем домене белка у 7 штаммов с высоким уровнем и у 4 штаммов с низким уровнем токсинопродукции. 1 штамм с низкой токсинопродукцией содержал 1 миссенс-мутацию (I221T). 3 штамма, в том числе 2 штамма с повышенной токсинопродукцией, не имели нуклеотидных замен, как и нетоксигенный штамм C7(-). Все 10 анализируемых штаммов, относящиеся к эпидемическим риботипам Sankt-Peterburg и Rossija, так же, как и штамм NCTC13129, явившийся этиологической причиной эпидемии дифтерии в Восточной Европе, содержали 2 мутации — A147V и L214I в C-концевой части белка-репрессора дифтерийного токсина (DtxR).