Молекулярная генетика, микробиология и вирусология №1 2007

Хоменков В. Г., Казеева Т. Н., Шевелев Б. И., Барграссер В. П., Скоблов М. Ю., Шевелев А. Б.

Клонирование и экспрессия генов IgA-специфичных протеаз Neisseria meningitides

IgA1-специфичные эндопептидазы (игазы) широко известны в качестве одного из ключевых факторов патогенности менингококка (Neisseria meningitidis), а также ряда других родственных бактерий. Эти ферменты проявляют высокую избирательность при распознавании субстрата: они способны отличать IgA1 от IgA2, а также IgA1 человека от IgA1 других видов млекопитающих [8]. Недавно появились сообщения о наличии у менингококков дополнительных IgA1-процессирующих ферментов наряду с каноническим. Однако субстратная специфичность "альтернативной" игазы, ее роль в патогенезе и способность комплементировать функциональную активность канонической игазы остаются неизученными.
В рамках настоящей работы мы исследовали структуру генов игаз и их продуктов у двух высоковирулентных штаммов N. meningitidis серогруппы A: M9 и A208. В геномах обоих штаммов мы обнаружили не менее двух генов игаз: они были депонированы в банк генов NCBI Gene Bank под номерами доступа: AY770504, AY558158, AY558159. Установленные последовательности генов "классических" игаз полностью или в основном совпадали друг с другом и с генами игаз из ранее исследованных штаммов. Напротив, в составе генов недавно открытой альтернативной игазы (ранее известной как менингококковый адгезин I типа) был обнаружен гипервариабельный район длиной 900 п. н., располагающийся в 5’-концевой части гена. Фрагменты гена классической игазы были успешно экспрессированы в Е. coli в форме тел включения. Рекомбинантные продукты были использованы для иммунизации кроликов. Полученные антитела эффективно реагировали как с рекомбинантным, так и с природным антигеном в составе культуральной жидкости N. meningitidis.